2023年12月15日发(作者:)

尼康荧光显微镜技术特点

一、 光学系统:尼康CFI60无限远光学以其卓越的成像质量受到全球市场的高度好评,齐焦距离60mm。对人眼观察和数字化成像都是最优的物镜:1、提升的边缘性性和平场度2、消渐光晕(亮度的差别小于5%)3、提升的紫外DAPI 和其他滤光片的焦平面的性能。

二、 80i 主机的标准配置配备了新的复眼透镜系统 ,“复眼”透镜阵列使视场边缘的光强达到视场中心光强的90%,所以完全能适用数字成像的照明。使目镜的视场数达到25mm以上。

三、 噪声消除器(HiS/N)是80i 荧光装置的标准特征,信噪比提高了5倍,电动快速低噪声马达滤光片转盘。

四、 电动控制装置精巧方便,130W高效长寿命荧光装置,无需调中,滤光片电动快速转换,低噪声,使用寿命2000小时以上,同为NIKON产品,提高产品整体性,方便售后服务

五、 扩展了人机学性能。新的矩形机械台:固定位手轮、扭力矩手轮调节,可延伸的工作台固定把手位、超硬铝合金工作台表面。人机学主机。

显微镜构成

尼康显微镜80i的主要构成:(如下图所示)

1、80i显微镜主机

2、聚光镜

3、载物台及夹片器

4、荧光物镜:10倍 40倍 100倍

5、物镜转盘

6、电动荧光装置:包含荧光专用激发块

7、C-BOX2控制器

8、双目观察镜筒及照像端口

9、目镜

10、视频接口

11、冷CCD

12、长寿命荧光光源

主要可调节的部分:(如下图所示)

长寿命荧光光纤照明器

显微观察方法

明场显微术:

1 打开电源装置的开关。将显微镜主机后面的电源开关置于 “I”的位置。电源指示灯亮。

2 按预置开关(显微镜前面的绿色按钮)打开明场照明。

3 将显微镜右下部的ND8、ND32 和NCB11 减光片移至光路中。

(NCB11是白光平衡片,ND8、ND32两个减光片分别将光强减弱为原来的1/8和1/32)

4 推入目镜筒上面的光路转换杆,对准双目镜筒使光路充满

5 转动激发方式转换盘放在没有激发块的空位处

(打开显微镜右后面C-BOX2的开关,通过控制器选择没有荧光块的空位转入光路中)

6 提升聚光镜到最高位置。

7 将视场光阑和孔径光阑完全开启

8 将10 倍物镜置于光路中。

9 放置标本,将需要观察的部位置于光路中

10 对标本调焦。

11 调节屈光度和瞳孔距离。

12 对聚光镜进行调焦和对中。

(将视场光阑调到最小,用聚光镜调焦旋钮调出清晰地多边形图像,并通过聚光镜对中螺丝使其居中,放大至与整个视野外切)

13 转换到所需的物镜,观察标本。每次转换物镜后都要调节视场光阑和孔径光阑。

14 观察完毕后关闭电源装置开关。

落射荧光显微术:

1 关闭显微镜电源开关。

2 关闭荧光光闸以阻断落射照明光。

3 将要使用的激发法相应荧光块移入光路。

(打开显微镜右后面C-BOX2的开关,通过控制器选择相应的荧光块转入光路中)

4 完全打开落射照明装置的视场光阑和孔径光阑

5 打开落射照明装置的电源开关,打开光闸后光源照明

(每次关闭汞灯后,请等候至少10 分钟,以使汞灯冷却后再开)

6 将10X 物镜置入光路。

7 放入标本并将要观察部分移入光路中。

8 对标本调焦。

9 转换到需要的物镜并观察标本。

• 用落射荧光装置的ND 减光片调解亮度。

• 调节视场光阑使其刚好外切视场。

• 用孔径光阑调节图像亮度,使用孔径光阑之前,先完成它的对中。

• 使用油浸物镜时,在标本和物镜间滴入浸油。

10 完成观察后关掉所有电源开关。

影响显微成像清晰度的因素很多,如调焦的准确性、光线的强弱、物镜的质量等。但是还有一个影响清晰度的重要因素——聚光镜孔径光阑的大小调节,这点却往往被人们忽视了,使拍出的显微照片时而清晰时而模糊,而不知道原因在哪里。其实造成这种情况的原因是没有真正理解聚光镜孔径光阑在显微成像中的全部功能。孔径光阑(Aperture Diaphragm)位于聚光镜透镜组的焦点平面之外,是一个接近于圆形的通光光圈。它的大小是可以调节的,孔径的开大与缩小能控制光束的直径。很多显微镜使用者在调试与使用时,对聚光镜的孔径光阑认识不足,往往忽视了对它的调节,以至视野中常因杂散光的影响而产生眩光或灰蒙蒙的效果。孔径光阑的主要功能是用来调节

聚光镜的数值孔径,使其与物镜的数值孔径做出适当的配合,以取得最佳的分辨率。孔径光阑影响显微图像的反差。将孔径光阑开的较大,视野很亮,但杂散光和眩光很多,对比度差。将孔径光阑开的较小,视野暗,成像细节不清晰。将孔径光阑开的适当,分辨率和反差上都最适合,图像清晰、对比度好。通常将孔径光阑的数值孔径调节到物镜数值孔径的60%-80%能达到好的图像效果。

影响荧光成像质量的一个重要因素是室内光线太亮,尽量在暗室操作,避免外部光线的影响。

维护与保养

透镜的清洁:

请确保透镜上没有灰尘或指纹。如果在透镜或滤光片上留下污渍会影响图像的效果。如果透镜沾上了污渍,请根据下列步骤进行清洁。

1. 用软刷刷去或用纱布拭去灰尘。

2. 如果透镜沾上了指纹或油脂,请用干净柔软的棉布、透镜清洁布或纱布沾上纯酒精(乙烷基或甲基酒精)后进行擦拭。

3. 对于物镜上的浸油,只能用石油醚清洁。为了获得最佳清洁效果,我们建议您在用石油醚清洁后,再次用纯酒精(乙烷基或甲基酒精)进行擦拭。在没有石油醚的情况下,您也可以单独使用甲基酒精。此时,

4. 请注意,您需要反复擦拭透镜表面才能够将浸油完全去除。通常情况下,擦拭三遍足以将透镜清洁干净。

5. 请勿用石油醚清洁目镜底部的透镜或棱镜。

6. 纯酒精和石油醚是高度易燃物质,使用这些物质时,尤其是在周围有明火和开启/关闭电源开关时请谨慎小心。

产品的清洁

1. 我们建议您使用硅布来清洁设备。

2. 处理顽固污渍时,请使用浸有稀释中性清洁剂的纱布轻柔地擦拭。

3. 在塑料部件的表面使用有机溶剂清洁,可能会导致变色。

对产品进行消毒:

1. 对设备进行常规消毒时,我们建议您使用70%浓度的医用酒精。

2. 如果标本与设备有了接触,请先判断是否为有害标本。如果是有害的,请根据您实验室的相关程序对其进行处理。

3. 在塑料部件的表面使用有机溶剂清洁,可能会导致变色。