2024年1月15日发(作者:)
第一章分子生物学发展简史
一.名词解释
分子生物学:分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平上阐述蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系及其基因表达调控的机理的学科。
基因组 : 是某个特定物种细胞内全部DNA分子的总和
二.论述题
1写出分子生物学事件简表并简单叙述3个重要事件
2.简述现代分子生物学的建立和发展阶段
① 遗传信息传递中心法则的建立
② 对蛋白质结构与功能的进一步认识
③ DNA双螺旋发现
三.填空题
重组技术的具体内容就是采用人工手段将不同来源的含某种特定基因的DNA片段进行重组,以达到改变生物基因类型和获得特定基因产物的目的的一种高科学技术。
2. Buchner兄弟19世纪末提出酶,脲酶的提纯和结晶证明酶的本质是蛋白质
3. Watson和Crick提出了DNA双螺旋模型
发现了连锁遗传 规律
证明了DNA是遗传学信息的载体
Avery确定DNA是遗传物质
Roderick在1986年提出基因组学
和Berg开创了基因工程
9 基因组学是指对所有基因进行基因组作图 (包括遗传图谱、物理图谱、转录本图谱 ) ,核苷酸序列分析,基因定位和基因功能分析的一门科学。
10 生物信息学是指应用信息科学的理论、方法和技术,管理、分析和利用生物分子数据的学科。
四.缩略词
DNFB 二硝基氟苯 PCD 细胞程序性死亡 RT 逆转录酶
RE 限制性内切酶 DNA 脱氧核糖核酸
第二章遗传物质的分子本质
一:名词解释
核酸的变性:是指核酸受到加热、极端的pH或离子强度的降低等因素或特殊的化学试剂的作用,其双螺旋区的氢键断裂,变成单链的过程,其中并不涉及共价键断裂。
复性 :当去除变性因素是,解开的互补单链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象称为复性。
二:论述题
1. 化学断裂法基本原理是什么?
碱基的修饰,
碱基的脱落,
戊糖-磷酸骨架被特异性切割,从而产生一组长度不同的DNA链降解产物,
经聚丙烯凝胶电泳分离和放射自显影之后,可直接读出待测DNA片段的核苷酸序列。
2. James Watson和Francis Crick于1953年提出的B型双螺旋,其主要内容是?
(1)DNA由两条呈反平行的多聚核苷酸链组成,两条链相互缠绕形成右手双螺旋;
(2)组成右手双螺旋的两条链是互补的,它们通过特殊的碱基对结合在一起,碱基配对规则是一条链上的A总是与另一条链的T,G总是和C以氢键配对。其中AT碱基对有二个氢键,GC碱基对有3个氢键;
(3)碱基对位于双螺旋的内部,并垂直于暴露在外的脱氧核糖磷酸骨架。碱基对之间通过疏水键和范德华力相互垛叠在一起,对双螺旋的稳定起一定的作用;
(4)双螺旋的表面含有明显的大沟和小沟(,其宽度分别为2.2nm和1.2nm;
(5)双螺旋的其它常数包括相邻碱基对距离为0.34nm,并相差约36°。螺旋的直经为2nm,每一转完整的螺旋含有10个碱基对,其高度为3.4nm。
三.填空题
1. DNA作为遗传物质的证据:细菌转化实验,噬菌体感染细菌实验 。 RNA作为遗传物质的证据:RNA病毒
2.碱基有强烈的紫外吸收,其最大吸收值在260nm。
3核酸合成的前体 NTP→RNA,dNTP→DNA;
双螺旋结构的证据: X射线衍射数据 , C hargaff 规则 , 碱基的互变异构
5双螺旋稳定的因素: 氢键, 碱基堆集力 , 阳离子或带正电荷的化合物对磷酸基团的中和
6. RNA的二级结构主要取决于它的碱基组成,它的二级结构为A型双螺旋。
7. 构成RNA的三级结构的主要元件有假节结构、“吻式”发夹结构和发夹环突触结构(等三种形式。tRNA则可形成倒L型三级结构
8. 构成tRNA二级结构的要素有:环、茎。
9. Tm实际是DNA的双螺旋有一半发生热变性时相应的温度,受到DNA的均一性、G-C含量、离子强度和特殊的化学试剂的影响。
10. 伴随着DNA复性的是其浮力密度和紫外吸收的减少、粘度的增加和生物活性的恢复,其中紫外吸收减少的现象被称为减色效应
四.缩略词
NDP 核苷二磷酸 NMP 核苷单磷酸 NTP核苷三磷酸
DMS 硫酸二甲酯 HIV 人免疫缺陷病毒
第三章 基因、基因组及基因组学
一:名词解释
基因:是DNA分子上具有特定功能的(或具有一定遗传效应的)核苷酸序列,是遗传的基本单位。
K值矛盾:生物体的复杂性与染色体数之间并不总是正相关
二.论述题
1. 基因按其产物的功能可分为哪几种各有什么功能?
答:分为结构基因、调控基因和RNA基因.
结构基因:可被转录形成mRNA,并进而翻译成多肽的基因。调控基因:指某些可调节控制结构基因表达的基因。RNA基因:是一些只转录不翻译的基因,包括核糖体RNA基因,专门转录rRNA;以及tRNA基因,专门转录tRNA。
2. 简述噬菌体的基因组分区。
(1)左侧区:包括参与噬菌体头部及尾部蛋白质合成的全部基因。
(2)中间区:占全基因组30%。部分基因与细菌整合到寄主DNA上和溶源生长有关。这
部分的基因不是噬菌体裂解生长所必需的,用其他外源DNA片段代替该区域对噬菌体的感染和生长都不会有严重影响。
(3)右侧区:包括主要的调控成分、噬菌体的复制基因(O和P)以及溶菌基因(S和R)。
三.填空题
1.基因是位于染色体上呈线性排列的遗传单位。它既是携带遗传信息的结构单位,又是控制遗传性状的功能单位
2.顺反子学说认为,顺反子是一段编码一种多肽链的核苷酸序列,是一个功能单位。
3. 含有内含子的基因称为不连续基因或断裂基因。
4. 基因按其产物的功能可分为:结构基因、调控基因和RNA基因.
5.决定生物复杂性的根本原因在于,基因是如何表达和管理的。
6. N值矛盾: 生物体的复杂性与基因数之间并不总是正相关。
7. K值矛盾: 生物体的复杂性与染色体数之间并不总是正相关。
8. C值:一个物种的单倍体基因组的全部DNA含量
9.基因组(genome):细胞或生物体中的所有DNA,包括基因和基因间隔区域。
10. 基因家族分为:基因簇 , 散布的基因家族
四.缩略词
SINE 短散布元件 LINE 长散布元件 HGP 人类基因组计划
ORF开放阅读框 ARS 自主复制序列
第四章DNA的生物合成
一.名词解释
复制叉:在DNA复制起始区域, DNA发生解链,形成叉状结构,称为复制叉。
冈崎片段:复制叉中不连续合成的DNA片段
二.论述题
复制的基本特点
①解链②复制方式—半保留③需引物④复制方向5′—3′⑤起始—特定区域,终止区不固定⑥方向—一般为双向⑦半不连续⑧高度忠实性 ⑨模板,dNTP, Mg2+
2.讨论 3’→5’核酸外切酶活性(A)与5’→3’核酸外切酶活性(B)的比较。
答:①A:作用于单链;B:作用于双链;
②A:作用方向,3’→5’; B:作用方向, 5’→3’
③ A:与聚合酶活性紧密结合,相互影响;B:与聚合酶活性无关,可同时进行;
三。填空題
的生物合成的两种手段:DNA复制,逆转录
2.说出三种多功能酶活性3’→5’核酸外切酶活性,5’→3’核酸外切酶活性,5’→3’核酸外切酶活性。
3. 复制原点的特征:多个短的重复序列 富含AT碱基对 被结合蛋白识别
4. DNA pol a 的作用是 引物合成,DNA pol b 作用是 DNA 的修复。
5. DNA拓扑异构酶催化DNA的一条链发生断裂和再连接,不需要能量;
6. 催化一条链的5’-磷酸末端与另一条链的3’-OH末端之间形成磷酸二酯健。
7. 反应需要消耗能量种类:细菌: NAD ;真核生物,病毒、噬菌体:ATP
生物合成的方向是(5’→3’)冈崎片段合成的方向是(5’→3’)
的中文名称(单链DNA结合蛋白),功能特点是(使单链保持伸长状态)。
10.在DNA复制过程中,改变DNA螺旋程度的酶叫(拓扑异构酶)。
四.缩略词
SSB 单链DNA结合蛋白 RPA 复制蛋白A PSNA 增殖细胞核抗原
TTT 端粒酶 ORC 起始区识别蛋白质复合体
第五章DNA 损伤修复和突变
一.名词解释
突变:发生在DNA上的可遗传的永久性结构变化统称为突变。
增变基因(mutator gene ):能够增加自发突变率的基因。
二.论述题
1 简要说说DNA损伤的因素以及类型。
答:因素:
内在因素:DNA结构本身的不稳定;DNA复制中的碱基错配; 氧自由基;.O2--
环境因素:化学因素:各种化学诱变剂,如黄曲霉素、烷基化试剂等
物理因素:紫外辐射和离子辐射(X射线和γ射线)
类型:
碱基损伤: 碱基丢失 ; 碱基转换 ; 碱基修饰; 碱基交联; 碱基错配 。
DNA链的损伤: 链的断裂 ; DNA链的交联 ;DNA与蛋白质之间的交联 。
2 列举DNA修复的方式。
答:1 直接修复;2. 切除修复;3.双链断裂修复;重组修复;4 易错修复。
三 填空题
1. 烷基化易发生的位置为鸟嘌呤的N7位碱基和腺嘌呤的N3。
2. 紫外线(Ultraviolet ,UV) 辐射可使同一条DNA链上邻近的嘧啶碱基交链形成二聚体
3. DNA 是唯一能够被修复的生物分子,其它的分子或被降解或被取代
4. NER机制:根据DNA的异常结构或异常化学性质识别损伤区域。然后切除和修复之。
途经的关键酶:切除核酸酶或DNA切割酶
6. E. coli 错配修复中甲基化涉及的基因有 mutS, mutH, and mutL.编码蛋白质分别是:
MutS 、 MutL MutH
7. 突变的类型:点突变 , 移码突变
8. 突变发生机理:自发突变, 诱发突变
9. 碱基损伤包括: 碱基丢失, 碱基转换 , 碱基修饰, 碱基交联, 碱基错配 。
10.切除修复先后经历识别,切除,重新合成,重新连接
四.缩略词
BER 碱基切除修复 NER核苷酸切除修复 MMR错配修复
TLS 跨越合成 ROS 细胞内活性氧
第六章DNA重组
一.名词解释
DNA重组:发生在DNA分子内或分子间的核苷酸序列的交换、重排和转移现象。。
转座重组:是指DNA上的核苷酸序列从一个位置转位或跳跃到另外一个位置的现象
二.论述题
1. 同源重组需要满足哪些条件?
答:(1)在交叉区域含有相同或几乎相同的碱基序列;2)双链DNA分子之间发生互补配对;(3)需要重组酶的催化;(4)形成异源双链;(5)发生联会 。
2插入序列(IS)的具有什么性质?
.(1)较小,长度一般在700bp -1800 bp之间;
(2)绝大多数两端含有10bp-40bp长的反向重复序列(IR);
(3)通常内部只有一个基因,编码的蛋白质是专门催化转位反应的转座酶(tnpA);
(4)通过“剪切”和“粘贴”的方式进行转座,转座结束后可导致插入点序列重复。
(5)有少数IS,没有明显的反向重复序列,它们是通过复制(滚环复制)与粘贴的方式进行转座的。
三.填空题
1.重组的类型:同源重组 位点特异性重组 转座重组
2.大肠杆菌主要的重组蛋白:RecA ,RecBCD, RuvA, RuvB , RuvC
参与大肠杆菌所有的同源重组途径,有单体和多聚体两种形式
蛋白是一种特殊的核酸内切酶,催化Holliday结构的分离,因此被称为解离酶。
5位点特异性重组的功能包括:调节噬菌体的整合;调节基因表达;调节胚胎发育期间程序性的DNA重排。
6.真核生物的转座子分为二类:反转座子, DNA转座子
7.转座的分子机制:“剪切”和“粘贴”机制 ,“复制”和“粘贴”机制。
8. RecBCD蛋白由RecB、RecC和RecD三个亚基组成。
9.位点特异性重组的步骤 链交换, 形成Holliday中间体, 分支迁移, 分离
10.转座机制分为简单转座,复制型转座
四.缩略词
IHF 整合宿主因子 IS插入序列 MGE 跳跃基因
IR 反向重复序列 MITE 反向重复转座元件
第七章RNA的生物合成
一.名词解释
启动子:DNA模板上专一地与RNA聚合酶结合并决定转录从何处起始的序列,也决定基因的转录效率。
反式作用因子: 则指的是对不同核酸链上的基因表达起到调控作用的蛋白
二.论述题
1 简述 DNA 转录与复制的异同点。
答:与DNA复制的共同性质:
1) 需要模板、解链和解旋 ;2) 只能按照5′→3′的方向进行。与DNA复制不同的性质:
1)不需要引物;2) NTPs 代替dNTPs; UTP代谢dTTP;3) 缺乏校对活性(错误率在1/104
-1/105 nts); 4) 发生在特定的区域(不是所有的DNA序列); 5) 对于一个特定的基因而言,只有一条链转录;
2.原核生物RNA聚合酶的结构与功能
所有的三类RNA由同一种RNA聚合酶催化
大肠杆菌的RNA聚合酶大小为465 kD,含有2 α, 1β, 1β′, 1σ, 1ω亚基。
全酶α2 ββ′ ω σ 核心酶: α2 ββ′ ω
亚基 基因 大小(kDa) 功能
α
β
β′
ω
σ70
RopA
RopB
RopC
RopZ
RopD
36
151
155
11
70
聚合酶的组装,转录的起始,与调节蛋白的相互作用转录的起始和延伸DNA结合
与ω一起构成催化中心
与DNA结合
与β亚基一起够成催化中心
启动子的识别
三.填空题
1. 启动子通常由转录起始点上游40bp长的序列组成包括两段一致序列:“-35 区” 一致序列是TTGACA Pribnow盒或“-10 区” 一致序列是TATAAT
2.原核生物的转录的终止有两种方式:依赖于ρ因子的终止 ,不需要ρ因子,但需要RNA转录物3′-端一段被称为终止子的序列
3.核心启动子包括:TATA盒、起始子(Inr)、TFIIB识别元件(BRE)、下游启动子元件(DPE)和GC盒。
4.参与蛋白质基因转录的转录因子有两类,一类为基础转录因子,另一类属于特异性转录因子。前者为所有的蛋白质基因表达所必需,后者为特定的基因表达所必需
5. 第一种被发现的合成核酸的酶是多聚核苷酸磷酸化酶(PNP )
6. RNA聚合酶只有 5′→3′的聚合酶活性,无5′-外切酶或3′-外切酶的活性。
7. 抗σ因子能够与内源的σ因子形成复合物,而抑制σ因子的功能
8. 真核细胞的细胞核具有三种RNA聚合酶: RNA聚合酶I(A)化细胞核内的rRNA(5S
rRNA除外)
RNA聚合酶II(B) mRNA RNA聚合酶III(C)小分子RNA(tRNA和5SrRNA)
9.转录的三步骤反应 起始 延伸 终止
10如果一个基因的启动子序列与一致序列越相近,则该启动子的效率就越高,为强启动子;如果一个基因的启动子序列与一致序列相差越大,则该启动子的效率就越低,为弱启动子。
四.缩略词
PNP 多聚核苷酸磷酸化酶 CTD 羧基端结构域 CRE cAMP反应元件
DPE下游启动子元件 BRE TFIIB识别元件
第八章转录后加工
一. 名词解释
顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关,能够被基因调控蛋白特异性识别和结
合的特异DNA序列.包括启动子,上游启动子元件,增强子,加尾信号和一些反应元件等.
,反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节
基因转录活性的蛋白质因子.
二. 论述题
1陈述为什么要有帽子结构?
答:提高mRNA的稳定性;
参与识别起始密码子的过程,提高mRNA的可翻译性;
有助于mRNA通过核孔从细胞核运输到细胞质;
提高剪接反应的效率。
2.为什么只有mRNA被snRNPs剪接?
RNA聚合酶的CTD是剪接必需的
剪接体内的剪接因子与CTD作用
这保证来自RNA聚合酶II的转录物处于和剪接机构正确的相互作用的位置。
三.填空题
1 真核细胞mRNA前体的后加工的形式分为:5′-端 = 加帽; 3′-端 = 加尾 ; 内部 =
剪接 ;内部=甲基化 ; 编码区=编辑 。
2 帽子结构的三种类型:0、I和 II型。
3 mRNA和某些snRNA有帽子结构,是因为它们都由聚合酶II催化。
4 PABP能够与帽子相互作用增强mRNA的可翻译性,提高其翻译的效率
5 一个典型的真核生物蛋白质的基因由10% 的外显子序列和90%的内含子序列组成。
6 剪接反应的“内因”——剪接信号,剪接反应的“外因”——snRNP和剪接因子
7 U2snRNA的作用是识别和结合分支点。在剪接体组装中,也与U6 snRNA 配对。
8 snRNPs和mRNA前体形成剪接体 。
9 列举3个snRNAs的作用:对于剪接十分重要;调节序列的特异性和剪接反应的精确性;折叠成特定的二级结构,这对催化十分重要;
10 mRNA前体的编辑的类型:尿苷酸的插入;C→U(哺乳动物的Apo B-48);A→I(哺乳动物谷氨酸受体的一个亚基)
四。缩略词
snRNP 核内小核糖核蛋白 BBP分支点结合蛋白 snRNA小分子细胞核蛋白
gRNA 指导RNA snoRNA小分子细胞核仁蛋白
第九章蛋白质的生物合成
一.名词解释
摆动规则:密码子在与反密码子之间进行碱基配对的时候,前两个碱基严格遵守标准的碱基配对规则,第三个碱基则具有一定的自由度。
转肽:由转肽酶催化A位的氨酰-tRNA上的氨基N亲核进攻P位的tRNA上的肽酰基或氨酰基而形成肽键。
二.论述题
1.简述核糖体的分类与组成
2. tmRNA的功能是?
(1) 将“滞留”在mRNA上的核糖体解脱下来
(2)将一段信号肽加在有缺陷的蛋白质C末端,使其有效的水解。
三.填空题
1.。终止密码子为 UAA UGA UAG
2. 遗传密码阅读的方向总是从mRNA的5′ 3′方向
3. tRNA通过3′端CCA-OH携带特异氨基酸,进入核糖体“A位”
4. 蛋白质生物合成起始阶段是指大、小亚基、mRNA和fMet-tRNA形成起始复合物
5. 肽链延长阶段是指进位、转肽和移位3个步骤的循环过程
6. 蛋白质生物合成时每形成1个肽键,需要消耗4个高能键
7. 原核翻译系统起始密码子的识别:mRNA 5′-端的SD序列 16S rRNA3′-端的反SD序列。
8. 反式翻译不同于一般的顺式翻译,它将两个mRNA翻译成一条融合的肽链,其中有一个mRNA分子无终止密码子,另一个mRNA分子是tmRNA。
9. 目前已有充分的证据表明大肠杆菌的肽酰转移酶由50S亚基上的23S rRNA承担
10. 蛋白质合成的每一步都需要一些特殊的可溶性的蛋白质因子的参与,包括:起始因子(IF) 延伸因子(EF) 释放因子(RF) 核糖体循环因子(RRF)
四.缩略词
起始因子(IF) 延伸因子(EF) 释放因子(RF) 核糖体循环因子(RRF)
氨酰-tRNA合成酶(aaRS)
第十章多肽链折叠与翻译后加工
一.名词解释
定向与分拣:蛋白质合成后所经历的转移和定位的过程称为蛋白质的定向与分拣。
信号斑:是存在于已折叠的蛋白质表面的三维分拣信号
二.论述题
1.为什么要进行翻译后加工?
1) 增加功能性 2) 实现定向和分拣 3) 调节活性
4) 提高机械强度 5) 改变识别
2.翻译后加工的主要方式?
多肽链的修剪、剪切或剪接 ;N-端添加氨基酸;氨基酸残基的修饰;二硫键的形成;添加辅助因子(金属离子、辅酶或辅基);多肽链的折叠和四级结构的形成
三.填空题
1.反式拼接发生在两个蛋白质分子之间的剪接
2.细胞内蛋白质定向、分拣的途径分为:共翻译途径 、 翻译后途径
3.蛋白质翻译后的定向与分拣 分为识别 、移位和成熟三步
4.信号肽:是一段在一级结构上连的续氨基酸序列,是蛋白质分拣信号。
5. 翻译后途经:细胞核编码的线粒体基质蛋白的定向转移
6.氨酰- tRNA是氨基酸供体
7. SRP是一种特殊的核糖核酸蛋白颗粒,在叶绿体和细菌中皆有发现
8. 信号斑是存在于已折叠的蛋白质表面的三维分拣信号。
9. 蛋白质从内质网→高尔基体→溶酶体或细胞膜(外)的小泡转运。
10. 定向与分拣:蛋白质合成后所经历的转移和定位的过程称为蛋白质的定向与分拣。
四.缩略词
PPI 肽基脯氨酸异构酶 SRP 信号识别颗粒 PTC 过氧化物酶体定向序列
IAP 关联蛋白 MSH 促黑激素
十一章基因的表达与调控
一.名词解释
基因表达:基因经过转录、翻译,产生具有特异生物学功能的蛋白质分子(少数RNA分子)的过程。
操纵子:是原核生物基因表达和调控的基本单位,包括结构基因和调控元件两部分。
二. 论述题
1.试述原核生物和真核生物转录的差异
原核生物
1.一种RNA聚合酶
2.不同启动子间有相当大的同源
性
3.聚合酶直接同启动子结合
4.转录的终止由在几个Us前转录
形成茎环
5.启动子通常位于基因的上游
6.转录单位常常含有多个基因
真核生物
多种RNA聚合酶
各种不同启动子间的差异较大
聚合酶通过同转录因子的相互作用促进结合
靠在转录过程特殊的核酸内切酶切割的序列介导
聚合酶Ⅲ的启动子位于下游
转录单位只含一个基因
2.简述衰减子作用机制
RNA终止子形成茎环结构后,RNA转录终止;若RNA中终止子茎环结构被阻止形成,则转录不能终止。
三.填空题
1. 负调控系统中的调节蛋白叫做阻遏蛋白
2. 加入调节蛋白与DNA序列相互作用之后,基因的表达就被关闭了,这样的调控就叫做负调控。
3. 诱导物(inducor)的结合能使阻遏物失活,
辅阻遏物(corepressor)的结合则能激活无活性的阻遏物,使之变为活性状态。
4. 无调节蛋白存在时基因是关闭的,加入调节蛋白后调节蛋白与DNA的结合能促进结构基因的表达,这样的调节方式叫做正调控。
5. 起始因子与启动子结合后,有利于RNA合成酶在启动子位置起始基因的转录。
6. 顺式作用元件(cis-acting element)是指对基因表达有调节活性的DNA序列,其活性只影响与其自身同处在一个DNA分子上的基因
7. 基因的产物(RNA或蛋白质)的作用属反式作用
8. 调节基因:编码与操纵子结合的调控蛋白的基因
9. 其中凡能引起诱导发生的分子称为诱导物(inducer),它与调控蛋白的结合能促进基因的表达
10.大肠杆菌利用乳糖至少需要需要两个酶:促使乳糖进入细菌的乳糖透过酶(lactose
permease)和催化乳糖分解第一步的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)。
四.缩略词
IPTG 异丙基硫代半乳糖苷 CRP cAMP受体蛋白 CAP 分解代谢物激活蛋白
VAI 费氏弧菌诱导物 AHL 高丝氨酸内脂类
十二章真核生物基因表达的调控
一.名词解释
锌指结构:由一个锌离子、两个Cys和两个His共同形成的指状结构域
绝缘子:是不让其他调控元件对基因的活化效应或失活效应发生作用的一种调控序列。
二. 论述题
1.简述真核生物基因表达调控的特点:
基因组和染色体结构复杂; 转录和翻译在时空上分开;
多细胞、多组织生物
2. DNA结合蛋白的作用特点
不同的DNA结合蛋白可以形成异二聚体; 异二聚体的形成可以增加转录调控的多样性;依靠α螺旋中的氨基酸残基与DNA 大沟中的碱基直接作用;
三.填空题
1. 三种主要的模式调节基因调节果蝇胚胎的发育:母性基因(maternal)、分节基因(segmentation)、同源异型基因(homeotic)
2. 外界刺激通常并不直接改变转录激活因子的活性,而是通过一系列的蛋白质将信号逐级传递,构成信号传导途径。
3. 结构转录因子:改变DNA调控区形状,促进转录的蛋白质因子;
4. 转录激活因子的结构 DNA结合结构域 、转录激活结构域 、二聚化结构域、
效应分子结合位点
5. 常染色质区的基因具有转录活性,染色质区的组蛋白是乙酰化的;
6. 异染色质区的组蛋白乙酰化不足
7. 组蛋白乙酰化和去乙酰化对基因转录活性的影响:未乙酰化的组蛋白可以抑制转录;
乙酰化的组蛋白抑制转录的能力减弱;
8. 真核生物基因转录的活化依赖于染色质重塑
9. 核小体核心:H2A, H2B, H3, H4
10. 核小体组蛋白:中心结构域、氨基末端结构域
四.缩略词
HAT 组蛋白乙酰转移酶 HDAC1 组蛋白去乙酰化酶 IREs 铁离子应答元件
TPE 端粒位置效应 HD 同源结构域
十三章分子生物学
一.名词解释
基因文库:是指一个包含了某一生物体全部DNA序列的克隆群体。
功能性克隆:从对一种致病基因的功能的了解出发,克隆该致病基因。
二. 论述题
1.简述PCR的主要用途
(一)目的基因的克隆
(二)基因的体外突变
(三)DNA和RNA的微量分析
(四)DNA序列测定
(五)基因突变分析
2. 蛋白质之间相互作用研究的重要性
蛋白质之间相互作用以及通过相互作用而形成的蛋白复合物是细胞各种基本功能的主要完成者。几乎所有的重要生命活动,包括DNA的复制与转录、蛋白质的合成与分泌、信号转导和代谢等等,都离不开蛋白质之间的相互作用。
三.填空题
印迹技术 (Northern blotting) 用于RNA的定性定量分析。
2.蛋白质的印迹分析 (Western blotting) 用于蛋白质定性定量及相互作用研究。
体系基本组成成分 模板DNA 、特异性引物、 耐热DNA聚合酶、 dNTPs 、 Mg2+
4.核酸序列分析的基本原理 化学裂解法 、DNA链的末端合成终止法
5.功能互补试验利用酵母系统从功能学角度鉴定致病基因。
6.基因剔除技术也称基因靶向(gene targeting)灭活,有目的去除动物体内某种基因的技术。
7.重要的PCR衍生技术 反转录PCR技术 、原位PCR技术、 实时PCR技术
8.在DNA复性过程中,如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中,或把DNA与RNA放在一起,只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定的碱基配对关系,就可以在不同的分子之间形成杂化双链(heteroduplex) 。
9. 定位克隆从一种致病基因的染色体定位出发逐步缩小范围,最后克隆该基因。
10. 将动物体细胞核全部导入另一个体的去胞核的受精卵内,使之发育成个体,即克隆
四.缩略词
MCS 多克隆位点 FISH 荧光原位杂交 PCR 聚合酶链式反应
RE 限制性核酸内切酶 BAC 细菌人工染色体


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