2024年3月19日发(作者：)

二代测序DNA剪切（核酸打断）流程及注意事项

使用仪器

核酸打断仪：Bioruptor pico（Diagenode）

振荡混匀器：SA8（Stuart）

迷你离心机：Multi Spin （Tomy）

DNA剪切（核酸打断）流程

1. 将冷循环机中装满蒸馏水或纯净水或RO水. 不可用去离子水

2. 先开冷循环机电源以及压缩机开关，再将超声仪主电源打开，让水保持循环状态直到4度之

后才可使用

3. DNA样本溶于1x TE buffer中，体积100ul，

DNA浓度：1~20ng/ul (10ng/ul最佳)

4. 设定仪器超声时间 (Time ON); 暂停时间 (Time Off); 以及超声循环数(Cycles); 厂家推荐

循环参数如下表，在此基础上客户可自行调整

5. 将样品管以对称形式放入适配器中，空的地方请补空管，空管中加入与样本一样体积的蒸馏

水即可

6. 按下超声仪启动按键，根据总循环数设定5~10个循环为一次，停机后取下样本vortex & spin

down 后继续第二次、第三次等

7. 超声仪使用完毕后，请先关闭冷循环压缩机与电源，再关闭超声仪电源，并将适配器擦干后

安全放置

使用安全注意事项

1.

每周至少要换一次水 (蒸馏水). 不可使用去离子水. 不可加入抗冻剂，杀藻剂等任何添加剂

进入冷循环机

2.

冷循环水机的首次设定温度是4度以后机器就可以保持该设定温度，不需要今后使用再设定

3.

超声水槽内必须保证有水才可以启动超声，不可无水超声

4.

仪器连续使用一小时后，保证仪器停止超声至少20分钟. 此过程须保持冷循环机正常运作，

超声仪电源开启的状态

5.

仪器运作时不可突然关闭电源，如要关闭电源，必须先停止仪器运转之后才可关闭电源

6.

每天必须关闭电源，不可让仪器运转过夜

7.

仪器不可任意搬动，冷循环机不可置于桌上，必须放置于地面

8.

仪器运转时不可用外力强迫适配器旋转马达停止

9.

超声波水槽不可用尖锐物品碰触或刮擦，不可加入高盐或腐蚀性液体

10.

未经操作培训的人员严禁使用仪器