2024年4月19日发(作者:)
空间转录组barcode的原理
空间转录组barcode技术是一种在转录组水平上区分不同细胞类型的
方法。通过添加一种独特的空间条形码,可以将不同来源的RNA分别
标记并整合在一个样品中,从而使得我们可以在单个样品中同时研究
多个细胞类型。这个方法旨在破解单细胞RNA测序数据的细胞组成信
息不充分,捕获数量不足等问题。
空间转录组barcode技术主要包括三个部分:固定、逆转录和扩增。
在固定步骤中,组织样本中的RNA分子与表示细胞位置的二维条形码
相相结合。
在逆转录步骤中,RNA的cDNA序列将被合成,并且此时条形码将作
为位于cDNA上的定位标记。这些标记会帮助我们确定扩增产物的来
源。在扩增步骤中,PCR扩增某个兴趣基因,包括附加了条形码的
cDNA,以及用于定量的Flipin和Flipout引物。
此外,对于独特的空间条码,我们还需要对其设计进行考虑。空间条
码应当具有较高的独特性,以确保在任何时候我们都可以准确地将每
个标记与其来源关联。这些条形码也必须足够短,以允许我们同时执
行其他目的,如用于低深度基因表达研究。
总的来说,空间转录组barcode技术是一种求解单细胞RNA测序数
据中缺乏细胞类型表达的前沿技术。它可以同时考虑多个来源,并且
更多地了解细胞间的差异。
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