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７２・
中国医院药学杂志２００２年第２２卷第２期Ｃｈｉｌｌ｝ ｐ Ｐｈａｍｌ Ｊ，２００２ Ｆｅｂ，Ｖｄ ２２，Ｎ。２
３讨论
业或医院药房对注射用阿洛西林钠的快速测定。
曾用１％碳酸氢钠溶液溶解阿洛西林对照品，但
参考文献：
酸化后会产生气泡，影响测定，所以选用氢氧化钠溶
［Ｉ］ 中华人民共和国卫生部部标准（试行）［Ｓ］ＷＳ￣Ｉ２１（ｘ ３６３）
液作为溶剂。
９５
由于ＦＩＡ可在物理及化学不平衡状态下进行
［２Ｊ ＵＳＰ 盖呵 ｓＪ １５４
［３］ＵＳＰ ２４ Ｓ］１８０１ １８０２
定量分析，故本法可以显著地提高分析速度
［４］安登魁药物分析：Ｍ］济南：济南出版社，１９９４ １５８４
本法线性范围宽，操作简便易行，适用于生产企
［收穰日期］：２０００—１２．２８
褪黑素的体外经皮扩散试验及其滞留时间法的评价
齐瑗晶．赵子彦．薛克亮，李惠金，栾扬，孟晓东 （山东省医学科学院药物研究所，山东济南２５００６２）
［摘要］ 目的：用滞留时间法评价所得褪黑素的经皮渗透参数，并根据所得参数推断褪黑素能否制成经皮培药制荆。方法：
用６个扩散池进行褪黑素体外２４ ｈ的经皮扩散试验，并计算出褪黑素的扩散系数Ｄ、分配系数Ｋ 稳态通量Ｌ等参数。用
滞留时间法特这些参数进行了验证 结果：证明所得参数基奉正确。结论：褪黑素完全可以制成体外经皮路药制荆。
［关键词］褪黑素；经皮扩散；滞留时间法
［中囤分类号】Ｒ９８６ ［文献标识码］Ａ ［文章编号】１００１．５２１３（２００２）０２ ００７２．０２
Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｌａｇ ｔｉｍｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｍｅｌａｔｏｎｉｎ
ＱＩ Ｙｕａｎ—Ｊｉｎｇ，ＺＨＡＯ 一Ｙａｈ，ＸＩＥ Ｋｅ—Ｌｉａｎｇ，ｅｔ ａｌ（Ｓｈａ￣ｄｏｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ．ｔｈｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｍａｔｅｒｉａｌ Ｍｅｄｉ
ｃａ．Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｊｉｎａｎ ２５００６２）
ＡＢ ＡＣＴ：０Ｂ】ＥＣｎＶＥ Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｐａｒａｎｌｅｔｅＩ￣ｏｆ ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｆｏｒ Ｍｅｌａｔｏｎｌｎ ＴｒＳ．ＭＥＩｔＩＯＤＳ Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｔｍ ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ ｏｆ
ｍｅｌａｔｏｎｉｎ ｓｔｕｄｉｅｄｉｎ ２＂４ ｈｏｕｒｓｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｔｈｅ ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ（Ｄ），ｐａｒｔｉｔｉｏｎ ｃｏｅｆｉｆｃｉｅｎｔ（Ｋ ）ａｎｄ ｓｔｕｄｙ－ｓｔａｔｅｆｌｕｘ（Ｌ）ｗｅｒｅ
ｇｏｔｔｅｎ．ＲＥ赃 Ｔｈｅ ｒ￣ｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ￣：ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮＳ Ｍｅ］ａｔｏｎｉｎ ｃａｎ ｂｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｆｏｒ，ＴＳ
ａｂｓｏｌｍｄｙ
ＫＥＹ ＷＯＲｌｄ：ｍｅｌａｔｏｎｉｎｉｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｔｕｓ ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ；ｔｈｅ ｌａｇ ｔｉｍｅ ｍｅｔｈｏｄ
白人类在牛的松果腺中分离并鉴定出褪黑素 外检测器，Ｗａｔｅｒｓ ２０１０色谱工作站，Ｋｒｏｍａｉｌ ５ ｐ－ｍ，
（ｍｅｌａｔｏｎｉｎ，简称ＭＴ），半个世纪以来人们对ＭＴ在 ｃ． 柱２５０ ｍｍｘ ４．６ ｉｎｒｎ）；褪黑素（山东新华制药
体内的作用进行了大量研究，并已达到了细胞分子
厂，批号：９８０９１２）；丙二醇，乙醇为分析纯；新西兰家
水平…。褪黑素作为松果腺激素，其主要作用是调
兔（鲁动质字９６０１０１），体重（２ ０±０．２）ｋｇ。
节机体的生物节律与外界相适应 Ｊ。动物试验和
２试验方法
临床应用均未观察到褪黑素的急性或慢性毒副作
２ １体外经皮扩散试验方法取已备皮的家兔皮
用ｌ ３。褪黑素作为保健品用于调节睡眠已在美国 ３ｌ
及我国上市。但已上市的制剂均为口服剂型，肝脏
肤，除去皮下脂肪组织，以生理盐水洗净。将该皮肤
首过效应将不可避免地降低这些制剂的药理作用。
切成约２５ ｃｍ２大小６块，分别固定在药物经皮扩散
本文进行了褪黑素体外经皮扩散试验，并将试验所
检测装置上。精密称取３７ ｒａｇ褪黑素加５０％丙二
得的参数用滞留时间（ ）法Ｈ一进行评价，为创新褪
醇水溶液１０ ｍｌ溶解，成３ ７ ｒａｇ・ｍｌＩ１的样品溶液。
黑素的经皮给药剂型提供理论依据。
分别精密量取样品溶液１．０ ｍｌ ５份，分别置人５个
１材料及仪器
药物经皮扩散检测装置内。精密量取丙二醇水溶液
ＺＲ—Ｕ型智能药物溶出仪（天津大学精密仪器
１．０ ｍｌ置入一个经皮扩散检测装置内，成为空白对
厂）；药物经皮扩散检测装置 自制，专利号
照样品。将上述６个药物经皮扩散检测装置与溶出
９６２２８６０７．９。该装置可直接连接在溶出仪的转篮柄
仪的转篮柄杆连接。接受介质为２０％乙醇１００．０
杆上，白上而下依次是：内筒（供体室）、动物皮肤、密
ｍ１。设置溶出仪参数：转速１００ ｒ・ｍｉｎ，温度
封垫及具有固定和搅拌功能的外套］ｉ Ａ１ｌｉａｎｃｅＨ—
３７℃，分别在１，２，３，４，９，１４，１９，２４ ｈ从各个杯内取
ＰＬＣ系统（Ｗａｔｅｒｓ公司，备有９９６型二极管列阵紫
样１ ０ ｍｌ，同时各补充新鲜接受介质１．０ ｍｌ。将样
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主堕堕堕堕芏壁查 芏塑垄查塑 塑￡ ・！堕 兀】 ］．
品液及空白液过滤，进行ＨＰＬＣ测定。
２ ２样品的ＨＰＬＣ法测定 取褪黑索原料药配成
系列浓度溶液，作线性关系测定，得浓度ｃ与峰面
积Ａ的回归方程为：
Ｃ＝１．３０５６２Ａ＋０．００６５７８．ｒ＝０ ９９９４
取空白对照样品、样品溶液各１Ｏ ，测定。在
空白样品色谱中样品主峰的１’ 位置上无吸收峰，
空白样品对样品测定无于扰
３试验结果及数据处理
各时问点的样品经ＨＰＬＣ法测定，将各时间点
的累积释放量换算成以ｍｍｏ［・㈨ 为单位，以取样
时间为横坐标，累积释放量为纵坐标，做扩散曲线，
结果见表１。
表１褪黑素的各时间点累积经皮扩散量ｃ”＝５）
Ｔａｂ ｌ Ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ ｔｒａｎｓｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｄｉｆｆ１Ｊｓｉｖｅ。。 ｔ ｎｔ ｍａ
ｔｃ￣ｉｆｎｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅｔｚｏｉｎｔｓ｛ ＝５
取样时间，ｈ
累积扩散量／ｎｍ￣［・咖 ．Ｘ １０
ｌ
０
０
０
０ ４３０５
０ ８【５８
１４
１ ５５８０
【９
３ ００４０
２４ ４ ３３４０
将上述观测数据中的后４个（稳态）数据按照滞
留时阃法 进行直线回归，得Ａ＝２ ４００１２ｔ×１０ ５
—
１ ５３２２４８×１０ 的直线（ｒ＝０．９９１８），Ｔｋ＝６ ３８
（ｈ），见图１。将ＴＩ 值、Ｃ （供体药物浓度）、ｈ（皮肤
角质层厚度，３５ ｍ）代入下列公式、得出褪黑素的
各种参数见表２。
Ａ＝， （ 一Ｔｔ ） （１）
Ｔｊ ：＾ ／６Ｄ，Ｊ ＝ＤＫ Ｃ ／ｈ （２）
表２褪黑素的经皮扩散参数
Ｔａｂ ２ ＴｒａｒＬｓｅｕｔ０ｎｅｏｕｓ ｄｉｆｆｕｓｉｖｅ ｐａｒｍｎｅｔｅｒｓ ｏｆ ｍａｌａｔｃａｆｉｎ
为验证试验所得Ｄ值和Ｋ 是否准确，将Ｄ和
Ｋ 值代入公式３中，再生整个渗透曲线。不同时
间的再生Ａ值（累积扩散量）用公式３以微机特设
程序计算得出。
Ａ＝ 差 ：
（３）
．ｖ。【婴！
７３・
褪黑素的再生扩散曲线见图１
。
—
，／
ｆｍ
图１褪黑幕的扩散曲线
～
匕一观测值；——辩苷留时间法－－－一再生值
Ｆ １ ｐｅｒｃｕｔａｎｅｃ￣ｃＨＹｅ ｏｆ ｍｅ［ａｔｏｉｎ
～ —ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｖ Ｔ ｍｏｔｈｏｄ；…一ｒｅｂｏｍｅｄ ｖａｌｕｅ
为证实再生扩散曲线与观测扩散曲线的相关
性，用观测数据作为自变量进行回归，得：
再生值＝斜率×观测值十截距＝１ ０８２６８４×观
测值＋１．１４０６１０×１０ （Ｒ ＝０ ９７５６）
根据滞留时间法，当再生曲线与观测曲线完全
重叠时，Ｒ ：１，直线回归方程的斜率将是１，截距Ｙ
将为零，说明试验所得的Ｄ、Ｋ 等参数准确。若
Ｒ 和斜率偏离１愈远，则说明试验所得参数的可信
度愈低。
４讨论
本试验的再生曲线斜率为１ ０８２６８４，说明再生
曲线相对于观测曲线是正向偏移趋势。
本试验的Ｒ 值为０ ９７５６，与１有一定的差距，
可能是试验时间稍短（Ｔ＝３．７×Ｔｔ．），且稳态区的
观测点较少（只有４个观测点）而造成的。本试验中
没有加任何促透剂，Ｄ值为３．１９８０７６×１０ ｍ１ －
ｈ，Ｊ 等于２．４６０２７×１０一 ｍｍｏｌ・ｃＩｎ～ 、ｈ。这些
数据提示，褪黑素完全可以做成外用经皮给药制剂。
参考文献：
［１］霍燕，李经才挺黑素作用机制分子水平研究进展Ｊ］时间医
学杂志．１９９８．３【２）：１４
［２］Ｒｄｔｅｒ Ｒ Ｊ Ａｔ ｔｈｅ ｃｕｔｔｉｎｇ。趣ｅ．ＭｅＬａｔｏｎｉｍ ｔｈｅ ｃｈｅｍｉｃａＬ ｅｘｐｒｅ￣一．
ｓｉｏｎ ｏｆ ｄａｒｋｎ￣．ｓ［Ｊ】ＭｏｌＣｅｌｌ Ｅａｄｏｃｒｉｎｏ［，１９９１．７９ １５３
［３１，ａｍｅｎｄｔ Ｊ Ｍｅｌｍｏｎｉｎ ａｎｄ ｒ￣ｔｈｒａｉｃ ｆｕｎｃｔｉｃｏ．ｓ ｉｎ ｒｎａｍｎ ｓ：ｔｈｅｍ—
ｐｅｕｉｆｃ ａｎｄ ｅｏｎ￣ｅｒｅｉａｌ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ［Ｊ］Ａｎｎ Ｒｅｖ ＣｈｒｏｎｏｐＭｒｒｒｍｃｄ，
１９９０．６：１３７
［４１ Ｊａｙｒｒａｎ Ｃ Ｓｈａｈ．Ｉｄｆｉｓ Ｋａｋａ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｐｅｒｃｕｔａｎｎｅｏｕｓ ｄａｔｅ：Ｅｖ
ｕａｉｆｏｎｏｆｔｈｅ ｂｇｔｉｍｅｍｅｔｈｅｄ［Ｊ］．Ｉｎｊ ｏｆＰｈａｎ￣，１９９４．１０９；２６３
『收稿日期］：２０００．１２—２８
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