2024年6月3日发(作者:)

中外医疗

2017 NO.17

China &Foreign Medical Treatment

病理研究

DOI:10.16662/.l674-0742.2017.17.030

NMBzAz

诱导大鼠食管癌动物模型相关的分子

机制探讨

贺婵婷

1

袁张玲

2

1.

山西医科大学人体解剖学教研室,山西太原

030001;2.

山西医科大学病理学教研室,山西太原

030001

[

摘要

]

目的探讨甲基苄基亚硝胺

(NMBzAz)

诱导大鼠食管癌动物模型相关的分子机制。方法

2015

1

月一

2016

10

月期间,该校病理学教研室选择

90

只健康清洁级

SD

大鼠作为研究动物,随机将

90

只大鼠分为观察组和对照组,

45

只。该组大鼠雌雄各半,均为

8

周龄。观察组大鼠

:

将甲基苄基亚硝胺

(

5mg/kg)

加入

2mL

纯净水中,食管内

灌注

;

对照组大鼠

:

食管灌注

2mL

纯净水;两组均灌注

1

/

周,连续灌注

30

周。实验后

10

20

周和

30

周时间点,两

组各宰杀

15

只大鼠,取食管组织,常规行病理学检查,查看两组食管癌发病情况。同时,提取食管组织总

RNA

,统计

两组不同时间段大鼠

survivinmRNA

转录水平。结果经病理证实:对照组无大鼠罹患食管癌,观察组实验

10

(26.67%)

20

周(

53.33%)

30

周(

86.67%)

后食管癌发病率均髙于对照组,组间差异有统计学意义

(P<0.05

)。观察组实

10

(0.25±0.09)、20

(0.26±0.11)、30

周后

(0.24±0.10

)食管组织

survivin mRNA

转录水平均髙于对照组

[(0.44±0.18

)、

(0.46±0.16)

(0.47±0.017)]

,组间差异有统计学意义

(P<0.05

)。结论

NMBzAz

诱导大鼠食管癌动物模型与

survivin mRNA

转录水平提升存在密切联系,可为食管癌分子靶向治疗提供参考依据。

[

关键词

]NMBzAz;

大鼠食管癌;动物模型;分子机制

[

中图分类号

]R735.1 [

文献标识码

]A [

文章编号

]1674-0742(2017)06(b)-0030-03

Study on NMBzAz Induced Rat Esophageal Cancer Animal Model Related

Molecular Mechanism

HE Chan-ting, ZHANG Ling2

ment of Human Anatomy, Shanxi Medical College, Taiyuan, Shanxi Province, 030001 China

ogical Teach­

ing and Research Room, Shanxi Medical College, Taiyuan, Shanxi Province, 030001 China

[Abstract] Objective

To study the NMBzAz induced rat esophageal cancer animal model related molecular mechanism.

Methods

90 cases of healthy SD rats in the pathological teaching and research room in our school from January 2015 to

October 2016 were selected and randomly divided into two groups with 45 cases in each, and half of rats were females and

half of rats were males, and all rates were 8 weeks, the rats in the observation group: methylbenzylnitrosamine 5 mg/kg was

put into 2ml pure water, esophageal infusion, rats in the control group: esophageal infusion of 2ml pure water, once every

two weeks for consecutive 30 weeks, and 15 rats were killed in 10 weeks, 20 weeks and 30 weeks after test and the

esophageal tissues were taken and were given the routine pathological examination, and the incidence of esophageal cancer

was searched, at the same time, the total RNA of esophageal tissues was taken out, and the survivin mRNA transcriptional

level of rats at different time phases was counted.

Results

The pathology proved that there were no rats with esophageal

cancer, and the morbidity of esophageal cancer in 10 weeks (26.67%), 20 weeks (53.33% )and 30 weeks (86.67% )were

higher than those in the control group(P<0.05), and the survivin mRNA transcriptional levels in 10 weeks (0.25±0.09), 20

weeks (0.26±0.11) and 30 weeks (0.24±0.10) in the observation group were higher than those in the control group [(0.44

0.18)

(0.46±0.16)

(0.47±0.017)], and the differences were statistically significant (P<0.05).

Conclusion

NMBzAz induced

rat esophageal cancer animal model is closely related to

[

基金项目

]

食管鳞癌组学测序结果的验证研究

(01201310

)。

the improvement of survivin mRNA transcriptional level,

[

作者简介

]

贺婵婷

(1989

-),女,湖南湘乡人,硕士,助教,主要

which can provide basis for the targeted treatment of

从事食管癌的分子机制方向的研究。

esophageal cancer molecules.

[

通讯作者

]

张玲

(1980

-),女,山西洪洞人,博士,副教授,主要

[Key words]

NMBzAz; Rat esophageal cancer; Animal

从事癌变机理及肿瘤分子标志谱方向的研究工作,

E-mail:

model; Molecular mechanism

zhanglingty@

30 中外医疗 China &Foreign Medical Treatment

病理研究

NMBzAz是一种亚硝胺类化合物,是与食管癌发病

关系最密切的硝酸盐类物质,其在诱导动物食管癌试

验中应用较多,建模效果较好'但是,目前尚未探明

NMBzAz诱导食管癌动物模型的分子机制,而这一机制

的探明对于人类食管癌治疗具有重要意义[2]。为此,2015

年1月一2016年10月期间,该校病理学教研室探索

NMBzAz诱导大鼠食管癌的分子机制。

1

材料与方法

1.1

实验材料

选择河北医科大学实验动物中心购进的90只健

康清洁级SD大鼠作为研究动物,随机将90只大鼠分

为观察组和对照组,各45只。该组大鼠雌雄各半,均为

8周龄。观察组,雌雄各半,体重160耀210 g,平均(185.13±

25.01)g。对照组,雌雄各半,体重170耀210 g,平均(180.03±

20.12)g。两组样本在体重、性别等一般资料方面,差异

无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2

实验方法

观察组大鼠:自由取食,将甲基苄基亚硝胺(国药

准字H32026237)(按5mg/kg)加人2mL纯净水中,食

管内灌注,1次/周,连续灌注30周;对照组大鼠:自由

取食,食管灌注2mL纯净水,1次/周,连续灌注30周。

两组大鼠实验室平均温度为(22±2)益,相对湿度60%c,

均使用普通饲料。

1.3

研究方法

实验后10、20周和30周时间点,两组各宰杀15只

大鼠,戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后处死,将食管纵行剖

开,取食管组织,常规行病理学检查,查看两组食管癌

发病情况。同时,取100 mg中段食管保存于RNA-guard

中,提取食管组织总RNA,采用异硫氰酸肌法(Trizol法)

进行survivin mRNA转录水平检测,统计两组不同时间

段大鼠survivin mRNA转录水平。

1.4

统计方法

该次研究采用SPSS 20.0统计学软件分析所有数

据,计量资料采用t检验,用(X依s )表示;计数资料采用

字2检验,用[n(%)]表示,P<0.05为差异有统计学意义。

2

结果

2.1

两组不同时间段大鼠食管癌发病率比较

经病理证实:对照组无大鼠罹患食管癌,观察组实

验 10 周(26.67%c)、20 周(53.33%c)、30 周(86.67%c)后食管

癌发病率均高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。

观察组实验30周后食管癌发病率最高,显著高于10周

和20周,差异有统计学意义(P<0.05),见表1。

2017 NO.17

China &Foreign Medical Treatment

中外医疗

表1两组不同时间段大鼠食管癌发病率比较[

n

(%。)】

组别10周

20周

30 周

观察组

4(26.67)*8(53.33)**13(86.67冤***

对照组

0(0.00)0(0.00)0(0.00冤

字2

4.0366.12517.230

P

0.0170.0180.001

注:* 与 **、*** 比较,

P

<0.05;** 与 *** 比较,

P

<0.05

2.2

两组不同时间段大鼠

survivin mRNA

转录水平

观察组实验10、20、30周后食管组织survivin

mRNA转录水平均高于对照组,组间差异有统计学意义

(P<0.05)。观察组实验10、20、30周后 survivin mRNA

转录水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2两组不同时间段大鼠

survivin

mRNA

转录水平(

X±s

)

组别

10周

20周

30 周

观察组

0.25±0.09

0.26±0.110.24±0.10

对照组

(0.44±0.18)*(0.46±0.16)**(0.47±0.017)***

t

15.01516.12715.203

P

0.0130.0080.005

注:* 与 **、*** 比较,

P

>0.05;** 与 *** 比较,

P

>0.05

猿讨论

亚硝胺类化合物是一种极强的强致癌污染物,可

诱导食管癌发生,而在大鼠食管癌动物模型诱导中,

NMBzAz最为常用,可较好的大鼠食管癌动物模型[3]。曾

有专家提出,采用NMBzAz诱导了大鼠食管癌动物模

型可明显提高食管癌发病率,周期越长发病率逐渐增

加,经过10周后观察其发病率仅有28.70%,20周后发

病率有所增加达到58.20%c,30周后可高达88.50%%4]。该

文结果显示,观察组食管癌发病率均高于对照组(无大

鼠罹患食管癌),与专家提出数据相符合,且观察组实

验30周后食管癌发病率最高,显著高于10周和20周

(P<0.05),可知经过30周的NMBzAz诱导,可成功建立

大鼠食管癌模型,而10周和20周效果不够理想,NM­

BzAz 灌注后 10 周 一寅20周一寅30周,食管癌发病率呈持

续上升趋势。

食管癌的发生与最强凋亡抑制因子一 一surviving

密切相关,而大鼠食管癌动物模型存在明显的survivin

mRNA转录水平升高表现,较正常大鼠升高50%c~200%c[5]。

该次研究可知NMBzAz诱导后大鼠食管组织始终处于

survivin mRNA转录水平较高的水平,同时出现了食管

癌发病率呈持续上升表现,可知大鼠食管癌发病与

survivin mRNA转录水平升高存在密切联系。但是,目前

survivin mRNA 转录水平导致大鼠食管癌发病的作用机

制尚不明确,仍需进一步探明[M]。NMBzAz诱导大鼠食

(下转第34页)

China &Foreign Medical Treatment 中外医疗 31

中外医疗

2017 NO.17

China &Foreign Medical Treatment

病理研究

DOI:10.16662/.l674-0742.2017.17.032

TCT

联合

HPV

-

DNA

分型检测在宫颈癌筛查中的

临床价值

钱红琴

江苏省常州市金坛区中医医院妇产科,江苏常州

213200

[

摘要

]

目的探讨分析宫颈癌筛查中应用新柏式薄层液基细胞学

(TCT)

和人乳头瘤病毒

(HPV)-DNA

分型联合检测的

1

月一

2017

1

月期间在该院妇科门诊就诊的

150

例妇女作为研究对象,根据不

同的检测方法分为实验组

(150

例,采用

TCT

检测)和对照组

(150

例,进行

TCT

联合

HPV-DNA

分型检测),根据宫颈

组织病理活检结果对比两组检测结果。结果组织病理学检查阳性

36

例,阳性检出率为

24.0

%,以组织病理学检查

结果为标准

,TCT

检查阳性准确率为

65.1%

HPV-DNA

阳性准确率为

93.8%。TCT

联合

HPV-DNA

检测灵敏度、特异

度分别为

96.37%c

87.49%sTCT

联合

HPV-DNA

检测明显髙于单纯

TCT

检测

(P<0.05

)。结论宫颈癌筛查中应用

TCT

联合

HPV-DNA

分型检测的灵敏度、准确率明显髙于单纯

TCT

检测,对于临床预防以及早期诊断宫颈癌具有极其重

要的意义。

临床价值。方法方便选取

2016

[

关键词

]

宫颈癌;筛查

;TCT

HPV-DNA

曰临床价值

[

中图分类号

]R737 [

文献标识码

]A [

文章编号

]1674-0742(2017)06(b)-0032-03

QIAN Hong-qin

Department of Gynecology and Obstetrics, Jintan District Hospital of Traditional Chinese Medicine, Changzhou, Jiangsu

Province, 213200 China

[Abstract] Objective

To discuss and analyze the clinical value of TCT and HPV-DNA somatotype test in the screening of

cervical carcinoma.

Methods

Convenient selection 150 cases of women in our hospital from January 2016 to January 2017

were selected and divided into two groups with 150 cases in each, the experimental group adopted the TCT test, while the

control group adopted the TCT and HPV-DNA somatotype test, and the test results were compared between the two groups.

Results

The histopathology examination showed that there were 36 positive cases and the positive test rate was 24.0%, and

the positive accuracy of TCT examination was 65.1% and the HPV-DNA positive accuracy rate was 93.8% and the sensitiv­

ity and specificity of TCT and HPV-DNA test were respectively 96.37% and 87.49%, which were obviously higher than

those of TCT test(P<0.05).

Conclusion

The sensitivity and accuracy of TCT and HPV-DNA somatotype test in the screen­

ing of cervical carcinoma are obviously higher than those of simple TCT test, which is of important significance to the clini­

cal prevention and early diagnosis of cervical carcinoma.

[Key words]

Cervical carcinoma; Screening; TCT; HPV-DNA; Clinical value

宫颈癌是临床较为常见的一种女性恶性肿瘤疾

病,发病率较高,仅仅低于乳腺癌'根据临床相关研究

表明

基细胞学检测

Clinical Value of TCT and HPV-DNA Somatotype Test in the Screening of

Cervical Carcinoma

(TCT)

、宫颈涂片或者

HPV-DNA

分型检

测等手段进行检测,传统的宫颈涂片虽然操作简便,取

材也比较方便,但是很容易受到血液、黏液等杂质的影

响,因此近年来应用越来越少

'T

有优劣,为进一步探讨宫颈

'

高危型

之一,宫颈

HPV

持续感染是导致宫颈癌的重要原因

癌患者伴有高危型

HPV

感染比例超过

90%

,早期诊断以及治疗可大大减少患者死亡率。但早

CT

HPV-DNA

检测各

癌筛查中应用

TCT

期宫颈癌患者并没有明显或者异常临床症状及体征,

因此误诊或漏诊率比较高。目前,临床常常采用宫颈液

[

作者简介

]

钱红琴(

1974

-),女,江苏常州人,本科,副主任医

师,研究方向

:

无保护会阴。

32 中外医疗 China &Foreign Medical Treatment

HPV-DNA

分型联合检测的临床价值,该文回顾性分析

了该院妇科门诊

2016

1

月一

2017

1

月期间收治

150

例妇女分别采用单纯

TCT

检测以及联合

HPV-

DNA

分型检测的临床资料。